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田克恭： 我国圆环病毒流行现状与新型疫苗研发进展
PCV2是全球养猪业的重大威胁，是阻碍养猪业发展的重要病原之一，在国内具有流行范围广，感染率高等特点。2010年普莱柯推出国内首个猪圆环病毒2型灭活疫苗，为猪圆环病毒2型病毒病的防控做出了重大贡献。经过7年市场临床应用和验证，多次生产工艺的优化和升级。此次发布的新工艺“圆健”，使用了水包油包水的进口新型佐剂，同时添加了自主研发的专利免疫增强剂，提升免疫效果。
PCV2是全球养猪业的重大威胁，是阻碍养猪业发展的重要病原之一，在国内具有流行范围广，感染率高等特点。2010年普莱柯推出国内首个猪圆环病毒2型灭活疫苗，为猪圆环病毒2型病毒病的防控做出了重大贡献。随着近年来猪圆环病毒2型灭活疫苗在市场上出现明显同质化，产品质量有待提升等问题。
普莱柯的猪圆环病毒2型灭活疫苗主要在病毒纯化技术的优化与升级，普莱柯对产品“圆健”猪圆环病毒2型灭活疫苗在病毒纯化技术进行优化与升级，新纯化工艺去除了病毒液中绝大部分宿主细胞蛋白和培养基中的BSA等异源蛋白，与纯化前相比减少了对猪体有限免疫资源的浪费。新的佐剂能更有效激发体液免疫和细胞免疫，提升疫苗免疫效果。
对猪圆环病毒2型病毒样颗粒疫苗的研发进行分析，一是基因工程重组菌的构建。通过生物信息学统计分析和基因合成、基因重组克隆技术构建50余株基因重组菌，并从中筛选一株最优菌株；
二是重组CAP蛋白的发酵、表达，经过摇瓶、发酵罐发酵工艺优化。CAP蛋白的表达量占总蛋白的30%以上，远高于业内10%左右的水平，并且经过三级全自动发酵罐工艺放大，已经实现CAP蛋白的规模化发酵表达；
三是重组CAP蛋白的纯化。经过价值近千万元的蛋白层析设备纯化，能得到高纯度的CAP蛋白，现在已经实现规模化生产。还是国内兽用生物制品中第一个采用蛋白质层析技术纯化的蛋白，纯化后蛋白纯度高于95%，远高于同类产品50%的纯度。内毒素含量降至500EU/ml，仅为同类产品的1/20。高纯度、低内毒素的蛋白大大降低了免疫后的应激反应。
四是病毒样颗粒的组装及解析。通过切向流超滤组装，将近100%的蛋白都组装成病毒样颗粒。透射电镜下能观察到CAP蛋白组成的20nm左右的病毒样颗粒，还通过高分辨率的冷冻电镜解析VLPs结构，可以看到体外组装的VLPs和病毒衣壳表面结构完全一致，这就保证了VLPs与全病毒具有相同的免疫原性，这样高纯度的蛋白和组装正确的病毒样颗粒代表着更安全、更有效的疫苗。
今年国内已有多家研究机构公布检出致病性的新型猪圆环病毒-PCV3，发现PCV3在安徽、重庆、福建、河北、河南、湖南、江苏、江西、辽宁、沈阳、浙江11个省流行。通过国家兽用药品工程技术研究中心收集福建、河北、河南、山东、江苏、四川、陕西、浙江等8个省份发病猪场189份临床样品用于PCV3抗原检测，阳性率达12.7%。并利用PCV3 ELISA抗体检测方法检测了江西、安徽、河南、四川、山东、辽宁、陕西、福建、河北、湖北、甘肃、江苏、天津、内蒙古14个省908份血清样品，阳性率达48.02%。田克恭主任表示，猪群如出现繁殖障碍、流产等症状须注意是否出现PCV3。普莱柯一直坚持创新成就未来的理念，已开始着手研发PCV3 病毒样颗粒疫苗，造福养猪业。
